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药典蜂蜜中蔗糖和麦芽糖的含量测定
2020.07.03   点击319次

1 实验部分

1.1 仪器配置

LC1620A Plus 高效液相色谱仪泵一台

RI-201H 示差折光检测器1 台,

ERC-3215 在线脱气机一台

AD 适配器一套

GMP 软件一套

SHODEX NH2P- 50 4E 4.6mm*250mm 色谱柱一根

FA2004 电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);

果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(>97%,国药试剂);

乙腈(色谱纯,美国Tedia);

纯净水(杭州娃哈哈)。

1.2 标准品溶液配制

分别精密称取果糖对照品1.0g,葡萄糖对照品0.8g,置同一具塞锥形瓶中,精密加入40% 乙腈20ml,溶解,摇匀,作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g,麦芽糖对照品0.2g,置同一具塞锥形瓶中,精密加人40 %乙腈10ml,溶解,摇勻,作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液,加4 0 %乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。

序号
混标浓度(mg/ml)
果糖
葡萄糖
蔗糖
麦芽糖
11080.50.5
215121.01.0
320162.02.0
425204.04.0
530246.06.0

1.3 样品前处理

取蜂蜜约lg,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加人4 0 %乙腈20ml,溶解,摇匀,滤过,取续滤液,作为样品溶液。

1.4 色谱条件:

色谱柱:Shodex NH2P-50 4E(4.6×250mm)

流动相:乙腈/水=75/25

流速:1.0ml/min

柱温:30℃

进样量:20ul

2 实验结果

2.1 标准曲线

将一系列浓度的标准溶液由低浓度到高浓度进样,以峰面积(纵坐标Y 轴)对标准品浓度(横坐标X 轴,mg/ml)进行线性回归,求算标准曲线,结果如下:

2.2 含量测定

2.2.1 样品中糖含量的测定

按“样品前处理” 操作制备样品,按上述所建立的HPLC 方法,对蜂蜜样品进行了分析。测定结果计算如下:

表1 蜂蜜含量的测定结果

项目A/果糖
A/葡萄糖
A/蔗糖
A/麦芽糖
含量mg/ml
21.1680
17.0152
0.0864
1.3158
含量(%) 
39.4788
38.3485
0.1754
1.5156

药典要求葡萄糖+果糖>60%,果糖/葡萄糖>1,蔗糖和麦芽糖<5%,符合药典要求。

蜂蜜样品的HPLC 谱图

3 结论

使用 LC1620Plus 泵配合 shodex 示差检测器,按药典方法操作,四种糖在Shodex NH2P-50 氨基柱上能得到良好的分离效果,按 3 倍噪声值计算,理论检出限为 0.2mg/ml,符合 2015 版药典的要求。

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